| 牛布鲁菌与牛分枝杆菌双重PCR方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 潘文,王波,薛红,赵明秋,琚春梅,陈金顶.牛布鲁菌与牛分枝杆菌双重PCR方法的建立及应用[J].航空工程进展,2010(4). |
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| 作者姓名： | 潘文 王波 薛红 赵明秋 琚春梅 陈金顶 |
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| 作者单位： | 潘文,王波,赵明秋,琚春梅,陈金顶(华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642);薛红(广州市动物卫生监督所,广东,广州,510440)? |
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| 基金项目： | 广东省动植物防疫检疫研究专项,国家自然科学基金-广东省自然科学基金联合项目,教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目? |
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| 摘 要： | 根据GenBank中已发表的流产布鲁菌种特异的omp25基因序列及牛分枝杆菌特异保守的16S rRNA加工蛋白rimM基因序列设计了2对特异性引物,通过对PCR条件的优化,建立了快速鉴别检测牛布鲁菌Brucella abortus和牛分枝杆菌Mycobacterium bovis的双重PCR方法.对建立的方法进行特异性和敏感性试验,结果显示,在牛布鲁菌和牛分枝杆菌中分别扩增出448、269 bp的特异性目的条带,作为对照的大肠杆菌Escherichia coli、沙门菌Salmonella typhimurium、八叠球菌Sarcina lutea、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、巴氏杆菌Pasteurella multocida、军团菌Legionella pneumophila、枯草杆菌Bacillus subtilis及溶血性链球菌Streptococcus pneumonia均未扩增出任何条带.牛布鲁菌和牛分枝杆菌的DNA 最低检出量均为10 pg;牛奶样品中人工污染的牛布鲁菌和牛分枝杆菌的检测敏感性分别为7.9×103 CFU/mL、3 ng/mL.
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| 关 键 词： | 牛布鲁菌 牛分枝杆菌 双重PCR 快速鉴别检测 |
Establishment and Application of a Multiplex PCR Assay for the Detection of Brucella abortus and/or Mycobacterium bovis |
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